蛋白质子化工具ProteinPrepare
在进行分子模拟之前一般需要对蛋白的结构进行优化，包括确定质子化状态和优化氢键网络等。PlayMolecule平台的ProteinPrepare所提供的交互式和命令行工具（需下载离线版本）能够实现这一功能。 
首先，用户上传pdb结构文件，然后选定需要处理的蛋白链，是否移除晶体水分子，是否将非标准氨基酸修改为标准氨基酸，并确定需要计算的pH值。
然后服务器后台会使用PROPKA-3.1来计算蛋白侧链的pKa值，然后通过如下公式计算质子化的概率p： \[ p=\dfrac {1} {1+10^{pK_{a}-pH}} \] 由上式可知，当\(\left| pH-pK_{a}\right| < 1\)时，概率p在0.1 - 0.9之间，这些残基的质子化状态并不是特别确定，因此ProteinPrepare会将这些残基列出，由用户自行决定质子化状态，当然，其它残基的质子化状态也可以由用户自行确定。
此后，服务器后台会使用PDB2PQR-2.1对氢键进行优化，主要包括补全缺失的重原子，然后加氢，然后对蛋白侧链进行优化（possibly flipping Gln, Asn, and His residues）。如果结构中含有水分子，那么蛋白-水分子，水分子-水分子的相互作用也会在优化的过程中被考虑。
计算完成后，ProteinPrepare会在主窗口的下方显示Protonation Table, Protonation Diagram, HTMD Code三个标签，分别对应一个包含所有信息的excel表格，一张标记残基pKa值的图片，以及对应处理过程的Python代码（用于离线版的命令行工具）。
主窗口的右方，会列出需要用户自行指定质子化状态的残基，以及所有其它可指定的残基。以上流程中，已经进行了第一次计算，如果对此结果满意，可直接下载目前已经处理好的pdb结构；若需要对某些残基的质子化状态进行手动指定，则指定完成后需点击Re-Prepare-Protein按钮再次进行计算。